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食品中11 種合成著色劑的測定

時(shí)間：2024-09-30 來源：本站閱讀：688

食品中11 種合成著色劑的測定

概述	新發(fā)布 GB 5009.35-2023《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中合成著色劑的測定》增加了靛藍(lán)、誘惑紅、酸性紅和喹啉黃 4 種合成著色劑，本標(biāo)準(zhǔn)代替 GB5009.35—2016《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中合成著色劑的測定》、GB5009.141—2016《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中誘惑紅的測定》、 GB/T9695.6—2008 《肉制品胭脂紅著色劑測定》、 GB/T21916—2008《水果罐頭中合成著色劑的測定高效液相色譜法》。
參考標(biāo)準(zhǔn)	參照 GB 5009.35-2023《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中合成著色劑的測定》
所用耗材	固相萃取柱選用：CH WAX混合型弱陰離子交換反相吸附固相萃取柱，150mg/6mL，（訂貨號：CH04-1506) 色譜柱選用：CH C18 AQ 色譜柱，粒徑 5μm ，型號為250x4.6mm（訂貨號：92-054625)
結(jié)論	1.CH WAX 150mg/6mL固相萃取柱回收率在85.84-99.11%之間，RSD%＜5%，滿足需求 2.CH C18 AQ 色譜柱測試11中色素的峰形尖銳對稱、分離度滿足需求。

一、測試過程：

1.1 前處理和凈化過程

1) 試樣提取

液體類試樣（雪碧）	準(zhǔn)確稱取常溫狀態(tài)試樣2g（精確至0.001g），置于50mL具塞離心管中，加入適量25mL乙醇氨水溶液（量取無水乙醇700mL，加入4mL氨水，用水稀釋至1L，混勻），渦旋1min，超聲提取10min，轉(zhuǎn)移至50mL容量瓶中，并用乙醇氨水定容至50mL；準(zhǔn)確吸取上清液10mL，50℃下氮吹濃縮至3mL左右，分2~3次共加入10mL5%甲醇水溶液，溶解混勻，待凈化
含油量較大的試樣（蛋糕）	準(zhǔn)確稱取試樣2g（精確至00.001g），置于50mL具塞離心管中，加入20mL石油醚，渦旋1min，超聲提取10min，8000r/min離心5min，棄去上清液，加入25mL乙醇氨水溶液，渦旋1min，超聲提取20min，8000r/min離心5min，取上清液置于50mL容量瓶中，每次加入5~10mL乙醇氨水溶液重復(fù)提取，至上清液無明顯顏色，合并上清液至50mL容量瓶中，并用乙醇氨水定容至50mL，搖勻；準(zhǔn)確吸取上清液10mL，50℃下氮吹濃縮至3mL左右，分2~3次共加入10mL5%甲醇水溶液，溶解混勻，待凈化。

2) 凈化過程：CH WAX混合型弱陰離子交換反相吸附固相萃取柱，150mg/6mL（訂貨號：CH04-1506)

活化：依次用6mL甲醇和6mL水活化WAX固相萃取柱

上樣：將1.1中的待凈化液全部上樣

淋洗：依次用6,mL2%甲酸水和6mL甲醇淋洗

洗脫：用6mL2%氨化甲醇溶液洗脫，分兩次加入，每次3mL，收集洗脫液

濃縮定容: 將收集的洗脫液于50℃下氮吹濃縮至近干，準(zhǔn)確加入2mLPH=9.0的20mmol/l乙酸銨緩沖溶液，渦旋搖勻，然后用針筒過濾器過0.45μm濾膜，取濾液作為待測液。

1.1 色譜條件：

色譜柱：CH C18 AQ色譜柱，粒徑 5μm ，型號為 250x4.6mm（訂貨號：92-054625)

流動相：A 為 20 mmol/L 乙酸銨溶液，B 為甲醇

時(shí)間(min) 0	B% 10
2	40
19	50
22.5	55
24	95
33	95
34	10
42	10

流速：1.0 mL/min

波長：415nm(檸檬黃、喹啉黃)

520nm(新紅、莧菜紅、胭脂紅、日落黃、誘惑紅、酸性紅和赤蘚紅)

610nm(靛藍(lán)、亮藍(lán))

柱溫：30℃

進(jìn)樣量：10μL

二、測試結(jié)果：

2.1 測試數(shù)據(jù)

雪碧基質(zhì)，加標(biāo)濃度（20μg/L）
名稱	CH		A品牌		B品牌
	回收率%	RSD%（n=5）	回收率%	RSD%（n=5）	回收率%	RSD%（n=5）
檸檬黃	96.38	1.32	90.18	2.41	97.10	2.00
喹啉黃	96.32	3.59	87.34	5.81	92.07	7.92
新紅	92.91	2.97	91.35	4.12	94.68	2.01
莧菜紅	99.11	1.87	93.96	3.98	95.40	5.02
胭脂紅	96.92	2.12	92.91	3.19	80.82	6.86
日落黃	93.21	1.82	90.32	7.22	98.71	2.08
誘惑紅	96.92	2.01	92.55	1.87	97.50	4.00
酸性紅	99.05	3.98	89.21	6.00	89.99	2.98
赤蘚紅	87.84	4.01	75.87	4.78	74.08	8.02
靛藍(lán)	90.88	4.89	88.41	4.21	89.59	3.94
亮藍(lán)	94.98	3.01	93.23	1.09	98.49	2.09

蛋糕基質(zhì)，加標(biāo)濃度（50μg/L）
名稱	CH		A品牌		B品牌
	回收率%	RSD%（n=5）	回收率%	RSD%（n=5）	回收率%	RSD%（n=5）
檸檬黃	97.39	1.23	90.34	3.21	95.50	3.64
喹啉黃	94.88	2.13	86.50	3.98	91.42	4.23
新紅	93.34	1.23	85.61	3.68	90.61	5.42
莧菜紅	97.80	1.43	88.86	3.67	93.90	1.31
胭脂紅	97.32	3.21	80.62	4.44	77.70	7.28
日落黃	97.27	2.10	89.90	2.35	95.01	2.53
誘惑紅	97.61	2.10	90.41	5.34	95.82	2.37
酸性紅	97.55	4.01	87.24	4.98	88.72	5.97
赤蘚紅	85.84	4.98	66.71	6.76	71.57	4.96
靛藍(lán)	89.90	4.44	85.07	5.97	88.29	5.39
亮藍(lán)	96.22	2.06	90.43	4.13	96.43	2.73

注：1. 喹啉黃回收率以4個(gè)峰總和計(jì)算，亮藍(lán)回收率以2個(gè)峰總和計(jì)算。

2. 所有基質(zhì)中均無對應(yīng)目標(biāo)物檢出

2.2 測試譜圖

檢測波長 415nm

檢測波長 520nm

檢測波長 610nm

說明:

1—檸檬黃; 2—新紅; 3—莧菜紅; 4—靛藍(lán);5—胭脂紅; 6—喹啉黃 1; 7—日落黃; 8—喹啉黃 2;9—誘惑紅; 10—酸性紅; 11———亮藍(lán) 1; 12—亮藍(lán) 2;13—喹啉黃 3; 14—喹啉黃 4; 15—赤蘚紅。

三、結(jié)論：

1. CH WAX 150mg/6mL固相萃取柱回收率在85.84-99.11%之間，RSD%＜5%。對比的另外兩家，部分物質(zhì)回收率＜75%，且RSD%＞5.0。可見CH WAX固相萃取柱測試11種色素，回收率優(yōu)異，穩(wěn)定性強(qiáng)，滿足使用需求。

2.CH C18 AQ色譜柱測試11種色素的峰形尖銳對稱、分離度滿足需求。

北京成黎生物科技有限公司

CH色譜柱

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